免疫試劑盒及膠體金定制
金開瑞試劑盒及膠體金服務擁有完善的ELISA試劑盒、膠體金免疫層析、熒光免疫層析開發平臺，專業的研發技術人員，結合成熟的抗原、抗體研發系統，可從事科研及診斷靶點的試劑盒、膠體金的研發以及抗原和抗體的標記、樣本代測、試劑盒及膠體金的組裝等定制服務。
| 服務內容 | 交付標準 | 周期 |
|---|---|---|
| 抗體配對測樣初篩 | 抗體標記，單配單進行配對測樣，可初步建立起標準曲線，收費100% | 1-2周 |
| ELISA檢測方法的建立 | 提供標準曲線及線性范圍，提供ELISA基本參數評價結果（LOD（最低檢測限）；批內和批間變異系數；37℃加速穩定性實驗）等數據 | 4-8周 |
| 樣品的檢測及評價方法的建立 | 提供檢測樣本數據（建議客戶提供經驗證過的陰陽性樣本作為對照，試劑盒檢測限：根據目標檢測蛋白在樣本的含量及客戶要求） | 2-3周 |
| 成品試劑盒 | 定制的ELISA試劑盒成品，可提供2-5個成品試劑盒（包被好的酶標板及配套的試劑盒組分等） | 3-5個工作日 |
| 服務內容 | 標準 | 周期 |
|---|---|---|
| 抗體配對測樣初篩 | 抗體標記并進行配對測樣，可初步建立起標準曲線，收費100% | 1-2周 |
| 配對抗原抗體工作條件的確定 | 確定抗原劃膜條件、抗體標記條件；確定試紙條檢測標準品的檢測濃度 | 1-2周 |
| 樣本前處理方法的確定 | 確定樣品前處理方法，提供檢測樣品數據（圖片形式） | 1-2周 |
| 膠體金卡性能評價 | 提供最終產品穩定性、重復性數據及交叉反應率（圖片形式） | 2-3周 |
| 成品檢測卡 | 200條成品檢測卡提供給客戶 | 1-2周 |
項目背景
客戶提供：目標蛋白基因序列
客戶要求：定制可用于ELISA試劑盒生產的抗體原料
項目進程：經過技術支持前期跟客戶之間的詳細溝通，得知該客戶需要達到診斷檢測的要求，希望能開發出符合預期的ELISA試劑盒，如果開發出較好的原料，可以進一步進行化學發光以及膠乳等產品研發。鑒于此項目工作量大，要求較高，特地組建項目小組，由專人分別負責抗原，抗體以及質控平臺，并詳細制定了每一步的執行方案。抗原部分，分別采用了大腸和酵母表達系統的重組蛋白+天然抗原共3種免疫原；抗體篩選階段，運用我司引進的上清階段表位分組的技術，對大量陽性克隆進行分組，為后期的配對提供了強有力的支撐；最后到達質控平臺的抗體原料經過檢測限標曲調試、熱穩、小試、中試、大試以及同類指標的交叉反應等方面驗證了抗體批內批間的變異系數，對抗體對的性能做了全面的評估。
部分結果展示
1、抗體滴度
根據客戶要求，最后共獲得4株單抗1#2#3#4#，4株抗體濃度統一稀釋到1mg/mL后再進行梯度稀釋，下表為ELISA檢測結果：
| 抗體稀釋度 | 1# | 2# | 3# | 4# |
|---|---|---|---|---|
| 1/1000 | 2.649 | 2.656 | 2.746 | 2.707 |
| 1/5000 | 2.547 | 2.555 | 2.714 | 1.162 |
| 1/25000 | 2.414 | 1.139 | 1.347 | 0.383 |
| 1/125000 | 1.139 | 0.236 | 0.339 | 0.153 |
| 1/625000 | 0.255 | 0.155 | 0.155 | 0.145 |
| 1/3125000 | 0.103 | 0.093 | 0.084 | 0.085 |
2、抗原識別
**1#2#3#鼠單抗分別作為包抗，4#鼠單抗標記HRP為檢抗，**4株鼠單抗均可識別天然樣本：
| 樣本 | 1# | 2# | 3# |
|---|---|---|---|
| 標準品100ng/ml | 2.301 | 2.311 | 2.359 |
| 標準品10ng/ml | 2.276 | 2.167 | 2.036 |
| 標準品1ng/ml | 1.049 | 0.513 | 0.641 |
| 正常血清①原液 | 2.151 | 2.141 | 1.442 |
| 正常血清①1:10 | 2.151 | 1.365 | 0.444 |
| 正常血清②1:10 | 2.266 | 1.554 | 0.695 |
| PBS | 0.177 | 0.138 | 0.192 |
產品應用
1、ELISA
所開發的4株單抗有多種配對組合方式，如2#為包抗，1#鼠單抗標記HRP為檢抗，ELISA標曲如下圖：
2、化學發光
2#為包抗，1#鼠單抗標記HRP為檢抗，標曲如下圖：
3、膠乳增強免疫比濁
將幾種單抗混合包被于膠乳顆粒，制備成膠乳試劑，然后檢查不同濃度蛋白校準品，線性擬合如下圖，相關性很好。
4、IHC
結論
金開瑞抗體平臺的研發團隊具備多年診斷原料開發經驗，可承接診斷類抗體相關業務。該項目所制備的**單克隆抗體可高靈敏，高特異的檢測人血清中的**蛋白，可用于 ELISA、化學發光、膠乳診斷試劑盒的開發。最終給客戶交付了一份滿意的答卷，并建立了長久的合作關系！
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