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    研究方案

外泌體(exosome),特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。其主要來源于細胞內內溶酶體微粒內陷形成的多囊泡體,經多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質中。現已證實可以分泌外泌體的細胞有:肥大細胞、淋巴細胞、樹突狀細胞、腫瘤細胞、間充質干細胞等。

外泌體在免疫中抗原呈遞、腫瘤的生長與遷移、組織損傷的修復等生理病理上起著重要的作用。同時,不同細胞分泌的外泌體具有不用的組成成分和功能,可作為疾病診斷的生物標志物。

服務內容

外泌體研究整體方案設計;
外泌體提取/粒徑測量/電鏡檢測;
外泌體蛋白組/轉錄組。

技術流程

技術運用(分離、鑒定、檢測、示蹤、共培養應用部分)

(a) Transmission electron microscopy demonstrates the presence of exosome vesicles (size bar5200 nm). (b) TRPS analysis of exosomes isolations confirming the expected size range of 30 –150 nm in diameter.

(c) No difference was observed in the total number of exosomes particles secreted from 30KT and 30KTp53/KRAS/LKB1 cells. (d) Western blot confirmation of exosomes markers indicates the presence of HSP70 and CD63 in exosome lysates (EL), but only Calnexin is present in cell lysates (CL) indicating pure preparations.

(e) Time course internalisation of exosome uptake in 30KT cells of DiD-labelled exosomes. (f) Confocal microscopy demonstrating DiD-labelled exosome uptake in 30KT cells after 24 hrs.

(g) After 48 hrs at previously established IC50 values for 30KT cells, 30KT cells exposed to 30KTp53/KRAS/LKB1 exosomes are more resistant to gemcitabine and cisplatin gemcitabine combination therapy.

(引自Lobb RJ, van Amerongen R, Wiegmans A, Ham S, Larsen JE, M?ller A. Exosomes derived from mesenchymal non-small cell lung cancer cells promote chemoresistance. Int J Cancer. 2017 Aug 1;141(3):614-620.)

客戶提供

細胞、培養上清、血漿(全血、血清)等

最終交付(根據具體項目)

泌體粒徑檢測報告;
WB檢測結果;
q-PCR相關檢測結果;
電鏡圖片;
NGS測序結題報告
蛋白組學結題報告。

服務周期

根據項目情況具體協定

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